目的 通过随机对照实验探讨维生素A对苯扎氯铵诱导的小鼠干眼的治疗作用。
方法 选用BALB/c雄性小鼠50只,使用0.25%的苯扎氯铵溶液局部点眼以诱导干眼。在第21天时根据泪膜破裂时间、角膜荧光素钠染色、炎症指数等参数选择干眼表现程度相似的眼并随机分为A、B、C三组。A、B组分别使用维生素A微乳剂及空白微乳剂滴眼,C组为空白对照组。治疗后第0、1、3、5、7天检测泪膜破裂时间和角膜上皮荧光素钠染色,眼表炎症程度及基础泪液量。治疗7天后取下小鼠眼球,进行HE及过碘酸-希夫(periodic acid-schiff, PAS)染色,角蛋白10(cytokeratin 10, K10)免疫荧光标记,以及Western blot检测角膜组织中K10表达水平。
结果 共30只小鼠(60眼)入选治疗实验,每组10只(20眼)。在使用药物治疗后的第0、1、3、5天各项临床指标无统计学差异。治疗第7天时,A、B、C组泪膜破裂时间 (BUT)分别为(4.200+0.8944)、(3.317+1.011)和(3.283+0.7436)秒;其中A组的BUT较B组和C组延长,差异具统计学意义(F=6.825,P=0.002)。A、B、C组角膜荧光素钠染色评分分别为(3.737+1.307)、(5.473+1.806)和(5.833+1.543)分;维生素A微乳组较空白微乳组和空白对照组角膜荧光素钠染色分级减轻,差异具有统计学意义(F=8.853,P=0.000)。各组间的角膜炎症指数评分、基础泪液分泌量均无统计学差异。组织病理示维生素A组相较空白微乳组和对照组,其角膜上皮形态及层数、杯状细胞数量都更接近正常组。维生素A组的角膜上皮层均几乎不表达K10,而空白微乳组及对照组仍阳性表达。Western blot示维生素A组角膜中的K10水平也与正常组相似。
结论 维生素A可以抑制苯扎氯铵诱导的小鼠干眼中的角膜上皮鳞状化生,并能增加结膜杯状细胞数量,有望作为一种新型人工泪液添加剂用于干眼治疗。 |