目的 探讨血管紧张素受体拮抗剂治疗糖尿病视网膜病变,缓解视网膜水肿过程中胶质细胞水通道蛋白(AQP)表达与分布的变化。
方法 取6周龄正常WISTAR大鼠,STZ腹腔注射(65mg/kg体重)造型糖Ⅰ糖尿病大鼠模型,分3组,一组为不用药糖尿病组,一组在饮水中加入血管紧张素受体拮抗剂颉沙坦,一组在饮水中加入β受体拮抗剂倍他洛克,另设一组为同龄正常大鼠对照组。8周后处死大鼠取视网膜,4眼做冰冻切片免疫组化,观察GFAP,AQP1,AQP4表达量变化,并观察AQP1,AQP4分布的细胞类型及在细胞上分布区域的变化。取6眼视网膜混合后取总蛋白,做Westernblot,检测GFAP,AQP1,AQP4量的变化。
结果 1)冰冻切片免疫组化发现正常大鼠视网膜内层表达少量GFAP,几乎不表达AQP1,AQP4在外核层以内均有表达,尤其以神经纤维层明显。糖尿病后GFAP表达明显增强,沿Muller细胞走向分布,视网膜内层星形胶质细胞出现明确AQP1表达,而AQP4在神经纤维层,内丛状层表达强度下降。颉沙坦治疗,GFAP表达与AQP1表达下降,AQP4表达在视网膜内层血管周表达重新增强。倍他洛克治疗组无明显变化2)Westernblot检测结果提示糖尿病组GFAP与AQP1表达在糖尿病组表达增强,颉沙坦治疗组表达量下降。AQP4在糖尿病组和药物治疗组表达量变化不显著。
结论 血管紧张素受体拮抗剂可缓解糖尿病视网膜水肿,抑制糖尿病视网膜星形胶质细胞上AQP1的表达,而恢复AQP4的极性分布。 |