目的 观察蓝光能否诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞发生复制衰老及蓝光对细胞内趋化因子白介素8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA表达的影响。
方法 培养人原代RPE细胞。将细胞分成实验组和对照组,实验组细胞置于不同强度的蓝光发光二极管光源下照射,对照组用黑纸完全包裹培养瓶,继续培养。将各组细胞的第3代到第5代,分别进行衰老相关-β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性的检测及半定量逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)法检测细胞内趋化因子mRNA的表达情况。
结果 随着蓝光光照强度的增加,复制衰老阳性细胞数目逐渐增多,不同光照强度之间差异有统计学意义(P=0.0031);随着传代次数增加,复制衰老阳性细胞数目逐渐增多,不同代次数之间差异具有统计学意义(P=0.0057)。通过半定量RT-PCR法检测,随光照强度增加及传代次数增加,IL-8和 MCP-1的表达增加,不同光照强度及不同传代次数之间差异有统计学意义(P<0.01)。随着人RPE细胞复制衰老的增加,细胞内趋化因子的表达增加,复制衰老和IL-8之间相关具有统计学意义(r=0.736,P=0.0087);复制衰老和MCP-1之间相关具有统计学意义(r=0.682,P=0.015)。
结论 蓝光光照可以促进人RPE细胞发生复制衰老,且其细胞内趋化因子表达增加,随着光照强度和传代次数增加,复制衰老细胞增多,细胞内趋化因子的表达也增加。为人RPE复制衰老细胞内趋化因子mRNA表达上调提供理论支持,对于阐释蓝光光照、RPE细胞复制衰老和炎症在AMD的发病机制中的作用提供理论依据。 |