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OIR大鼠模型中不同氧浓度下视网膜VEGF表达的动态研究           ★★★
OIR大鼠模型中不同氧浓度下视网膜VEGF表达的动态研究
作者:李雁 文章来源:四川大学华西医院眼科 点击数:308 更新时间:2011/9/13
目的  观察在不同氧浓度环境下OIR(oxygen-induced retinopathy)大鼠模型中视网膜血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,分析其与视网膜新生血管retinal neovascularization,RNV)的相关性,探讨VEGF因子表达与氧气浓度之间的关系。
方法  SD新生乳鼠80只随机分为4组(每组20只):80%、50%、35%氧气组以及空气对照组。空气对照组始终生长在正常氧环境中,各浓度组均于产后第7天(P7)时进入相应实验浓度的氧箱中,5天后返回正常氧环境生活。每组各取2只幼鼠,分别于P7(入箱前)、P9、P12、P14、P17、P20以realtime-PCR定量检测视网膜VEGFmRNA的动态表达情况,于P12、P17行荧光视网膜铺片观察各组视网膜血管发育和新生血管情况,并于P17时做眼球连续病理切片,观察突破内界膜的新生血管内皮细胞数。
结果  1.视网膜荧光灌注铺片:80%50%浓度组于P12时可见不同程度的视网膜毛细血管无灌注区,小血管管径粗细不均;P17时出现新生血管荧光素渗漏。空气组幼鼠在P12、P17都可观察到视网膜血管走形规整。35%浓度组P12、P17时未见明显的无灌注区及新生血管形成。2.血管内皮细胞计数:80%氧浓度组突破内界膜的血管内皮细胞核数较多,与其余三组比较,差异有显著统计学意义(P0.01);50%与35%浓度组、空气组比较,突破内界膜的新生血管内皮细胞核数增多(P<0.01)。35%浓度组与空气组相比,二者均很少见到新生血管内皮细胞核,差异无统计学意义(P>0.05)。3. realtime-PCR测定:不同时间点(P7、P9、P12、P14、P17、P20)各组VEGFmRNA的表达不同,空气组和35%浓度组在P7时表达最高,80%和50%浓度组在P17时表达最高。P12时,空气组和35%浓度组视网膜VEGFmRNA的表达量高于80%浓度组、50%浓度组,且差异有统计学意义(P<0.05)。P17时,80%浓度组视网膜VEGFmRNA的表达量较空气组和35%浓度组明显增加(P<0.01)。50%浓度组与35%浓度组、空气组比较,VEGFmRNA的表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。80%与 50%浓度组比较,80%组VEGFmRNA的表达量较50%组高,但差异无统计学意义(P>0.05)。
结论  50%以上浓度的氧阈可导致明显的视网膜无灌注区及继发视网膜新生血管形成,严重程度与氧浓度呈正相关;VEGFmRNA 在50%以上氧浓度时,明显下调,变化程度在80%和50%浓度组无明显差异。
会议投稿录入:毛进    责任编辑:毛进 
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