目的  探讨p38信号通路对体外培养的角膜缘干细胞和皮肤上皮干细胞增殖及分化的影响。
方法 人角膜缘和皮肤组织冰冻切片免疫染色，检测p38信号通路相关分子的表达。小鼠角膜缘干细胞系TKE2用KSFM培养基培养，人的皮肤上皮干细胞以3T3作滋养层用SHEM培养基体外培养。通过慢病毒诱导的方法，活化或抑制TKE2细胞和人皮肤上皮干细胞中p38信号通路的活性，并通过免疫印迹分析、免疫荧光染色，结合结晶紫染色和MTT检测等方法，检测p38信号通路的活性及干细胞标志物的表达水平的变化。
结果 在正常人的皮肤及角膜组织中，p38信号通路在人皮肤和角膜缘上皮表层部位活性较强。干细胞标记物p63、增殖性指标Ki67及增殖相关角蛋白K14、K16主要表达于皮肤及角膜缘上皮组织基底层，终末分化标志蛋白K10和K12分别表达于皮肤和角膜上皮的表层细胞中。Notch信号通路的下游基因Hes1，在皮肤和角膜上皮的基底层表达较强，表层细胞中表达减弱。抑制角膜缘和皮肤上皮干细胞中的p38信号通路，可显著提高其克隆形成率和形成面积，且克隆细胞中p63、K14、K16表达量增加，同时Notch信号通路受体Notch1和下游基因Hes1表达量也有所增加。
结论 p38信号通路可调节角膜缘干细胞和皮肤上皮干细胞的增殖与分化。抑制p38信号通路，有利于维持角膜缘干细胞和皮肤上皮干细胞在体外培养时的增殖能力。同时，抑制p38信号通路的活性，可以引起Notch信号通路的活性上调，并共同作用于上皮干细胞的增殖与分化进程。