目的 探讨紫杉醇(Taxol)对体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium, hRPE)细胞增殖的影响。方法 体外培养hRPE细胞并分为空白对照组和各浓度紫杉醇实验组(0.005、0.05、0.5、5mg/l)。相差显微镜及电镜下观察各组细胞及不同作用时间下细胞形态结构的变化、采用生长曲线及四唑盐(MTT)比色法检测药物对hRPE细胞增殖的影响、流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:细胞相差显微镜下除5 mg/l紫衫醇作用组可见明显细胞减少、部分细胞拉长、崩解和浮起外,其余各组细胞形态基本正常。对照组细胞分裂时间为1.95天,随着药物浓度增加细胞分裂时间随之延长。生长曲线图显示随着紫衫醇浓度的增加,作用时间的延长,对hRPE细胞的生长有明显的抑制作用,呈剂量时间效应关系。MTT法在波长为492nm下测定各组吸光值(OD值)并计算抑制率。结果示:各浓度药物组作用24小时后与对照组比较计算得抑制率,分别为20%、29%、41%、48%;72小时时分别为27%、34%、45%和58%。24小时和72小时的ID50分别为5.24和3.24 mg/l。流式细胞仪检测结果示:0.5mg/l紫衫醇作用组与对照组相比各细胞周期比例发生变化,细胞明显阻滞于G2/M期,凋亡指数增加。透射电镜结果示:对照组hRPE细胞周围可见大量的微绒毛,细胞器丰富,细胞核内可见多个核仁;0.5 mg/l紫杉醇作用后细胞表面微绒毛减少,电子密度变深, 细胞器减少,异染色质聚集成团、边聚等;5 mg/l紫杉醇作用组可见细胞器及细胞核空泡化,膜破裂等细胞坏死征象。结论:紫衫醇药物可以有效抑制体外培养的hRPE细胞的增殖并呈时间剂量效应关系。可为今后临床上药物防治增生性玻璃体视网膜病变提供实验依据. |