目的 ① 建立体外培养及标记人羊膜上皮细胞（HAECs）的方法；② 探讨人羊膜上皮细胞作为“种子细胞”向角膜上皮细胞转分化的可能性；③ 应用原子力显微镜（AFM）从细胞形貌变化上探讨人羊膜上皮细胞向角膜上皮细胞转分化的可能性。
方法 ① 取足月产人羊膜，采用酶消化法获得HAECs进行原代和传代培养，对培养的细胞进行形态学观察和鉴定，并观察荧光染料DAPI标记HAECs的效果；② HAECs与兔角膜基质细胞共培养2w，采用CK3+12免疫细胞荧光法鉴定诱导后的细胞；③ 应用AFM分别对共培养前后的人羊膜上皮细胞的形态结构和表面超微结构进行观察, 并与人角膜上皮细胞（HCECs）对比，分析细胞形貌的变化。
结果 ① HAECs体外培养呈铺路石样外观，核/浆比率小，连接成片。细胞形态为多角形，角蛋白keritin阳性表达，CK3+12阴性表达；DAPI荧光标记率100%，2w后标记率无改变，荧光强度减弱；② 共培养2w的HAECs免疫荧光阳性表达CK3+12；③ AFM观察，共培养2w后HAECs细胞核中央由山谷样外观转变成类似HCECs的山峰样外观。
结论 ① 体外可成功进行HAECs原代和传代培养，DAPI可作为有效的HAECs体外标记物；② HAECs在兔角膜基质细胞诱导培养条件下可以向角膜上皮细胞转分化；③ ATM从形态学方面客观上进一步证实与兔角膜基质细胞共培养可以成功诱导HAECs向CECs转分化。
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