目的 探讨Notch信号通路抑制剂DAPT对角膜内皮-间质细胞转化（EnMT）类疾病的治疗作用及机理。
方法 大鼠角膜内皮细胞自体内分离培养于SHEM培养基中，传1-2代后在培养基中分别添加TGFβ1、2、3以诱导角膜内皮细胞发生向间质细胞方向转化，部分细胞在加入TGFβ1、2、3的同时加入DAPT进行共培养。通过对以上培养的内皮细胞以实时荧光PCR以及免疫荧光染色检测DAPT对角膜内皮细胞EnMT相关基因的表达变化；以添加DAPT或0.1%DMSO的SHEM培养基分别培养大鼠角膜内皮细胞，连续培养至P5代，应用显微镜观察记录细胞形态变化，并分别提取P0、P1、P2和P5细胞总RNA，以实时荧光PCR法检测EnMT相关基因表达变化；以液氮冷冻损伤大鼠角膜内皮，以含DAPT和或0.1%DMSO的PBS对大鼠连续点眼处理16d，以裂隙灯、实体显微镜记录角膜形态变化，以HE染色检测两种处理条件对角膜内皮形态的影响，以免疫荧光染色的方法检测两种条件下角膜内皮中α-SMA蛋白含量变化。
结果 TGFβ1、2、3均可以不同程度上诱导大鼠角膜内皮细胞中α-SMA表达上调，在培养基中添加DAPT可明显下调TGFβ1、2、3诱导产出的α-SMA表达阳性细胞的数量并维持角膜内皮细胞在体外的生长形态；DAPT可明显抑制TGFβ1、2、3诱导的α-SMA表达上调，更好的维持内皮特异性的基因Cx43、N-Cadherin、ZO-1蛋白水平；DAPT可抑制抑制TGFβ1、2、3诱导的Notch信号通路多种基因如Jag1、Jag2、Notch1、Notch3和Numb等的表达下调；DAPT可明显抑制大鼠角膜内皮细胞在体外培养条件下α-SMA表达水平的不断升高，更好的维持内皮细胞形态；DAPT处理可抑制液氮冷冻所引发的角膜后纤维膜的形成，更好的维持角膜通透性，抑制角膜内皮细胞中α-SMA表达升高。
结论 DAPT可抑制TGFβ诱导的角膜内皮细胞向间质细胞的转化分化，对角膜损伤所引发的角膜内皮纤维化有一定的治疗作用，具体机制尚待深入研究。