目的:初步探讨bFGF作用于人晶体上皮细胞系SRA01/04内Ca2+的转导途径。
方法:人晶体上皮细胞系SRA01/04传代培养, 取第三代细胞传与30mm培养皿中, 在激光扫描共聚焦显微镜下向各组内分别加入10ng/mlbFGF,10mM咖啡因 ,10mMRyanodine、50mM普鲁卡因溶液,0.5mM Genistein,通过观测细胞内相对荧光密度实时观察细胞内Ca2+变化。
结果:10ng/ml bFGF 在细胞外液含与不含Ca2+,Mg2+的情况下,都可迅速引起HLEC内[Ca2+]浓度的升高,波形,持续时间没有显著差异,但细胞外液无Ca2+,Mg2+含EGTA时,钙振荡幅度显著大于细胞外液含Ca2+,Mg2+时; 50uM Procaine和10mM Ryanodine可小部分抑制bFGF引起的钙波,10mM Caffeine可大部分抑制追加的bFGF的作用; 0.5mM Genistein对bFGF有显著的抑制作用。
结论:bFGF主要通过激活络氨酸蛋白激酶信号转导途径引起SRA01/04内Ca2+浓度的升高,Ca2+主要来自细胞内钙库钙的释放,IP3R和RyR通道都起着一定的作用,而其中IP3R的作用更为重要。
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