目的 采用连续递增切除不同范围兔眼角膜缘干细胞组织,通过眼表形态学变化,角膜上皮印迹细胞学观察及组织病理学改变,确定角膜缘干细胞移植时健眼取材的安全范围。
方法 1. 按30°、60°、90°等依次递增至210°,分组切除兔眼角膜缘干细胞组织建立模型。2. 通过裂隙灯显微镜观察各组角膜混浊、上皮荧光染色、角膜新生血管、角膜上皮印迹细胞学检查及HE染色观察角膜上皮的细胞表型和组织病理学变化。3. 术后14、30天裂隙灯显微镜观察兔供眼角膜混浊、上皮荧光染色及角膜新生血管情况。
结果 1. 兔眼角膜缘切除范围大于150°时,角膜出现混浊、上皮持续缺损、新生血管长入及结膜上皮向角膜内生长等干细胞失代偿表现,评分比较有显著差异(P=0.000<0.01)。2. 在出现角膜缘干细胞失代偿的兔眼角膜上皮印迹细胞学检查中,可见PAS染色阳性的结膜杯状细胞。
结论 兔眼角膜缘干细胞移自体植健眼的取材范围≤150°(相当于5个钟点位)是安全的。角膜缘干细胞切取范围>150°可能出现不可逆的角膜缘干细胞失代偿。 |