目的 探讨灵杞黄斑颗粒含药血清对氧化应激诱导的人视网膜色素上皮细胞早衰的保护作用及机制。
方法 运用血清药理学方法制备灵杞黄斑颗粒含药血清,以过氧化氢(150 μmol/L)诱导建立体外人视网膜色素上皮细胞早衰模型,分为正常对照(NC)组、模型(M)组、模型+空白血清(MB)组、模型+低剂量药物血清(ML)组和模型+高剂量药物血清(MH)组,分别采用MTS、流式细胞法检测各组视网膜色素上皮细胞的活力和周期,衰老相关-β-半乳糖苷酶试剂盒检测其衰老。应用RT-PCR和Western Blot法检测细胞内转化生长因子β1基因和蛋白的表达。相关统计分析采用SAS9.13统计学软件。
结果 本研究结果显示灵杞黄斑颗粒含药血清从细胞形态、细胞增殖、细胞周期以及β-半乳糖苷酶活性染色方面证明对氧化应激诱导的RPE细胞早衰损伤有保护作用,但不同剂量间无显著统计学差异。进一步研究细胞早衰信号转导机制:灵杞黄斑颗粒能够抑制转化生长因子β1的表达。
结论 灵杞黄斑颗粒含药血清对氧化应激诱导的人视网膜色素上皮细胞早衰损伤具有一定的保护作用。可能抑制转化生长因子β1的表达,进而抑制p21CIP1/WAF1/Rb途径,也可能抑制p38MAPK/ATF-2/Rb途径来实现对早衰视网膜色素上皮细胞的保护作用。 |