目的 建立稳定的成人视神经乳头星形胶质细胞的原代纯化培养方法，为深入研究星形胶质细胞在青光眼或其他相关的视神经损伤疾病中的作用机制及防护策略提供理想的细胞模型。
方法 解剖显微镜下分离出人眼视神经乳头筛板组织，并将其剪切成4~6个小植片，放置于含有DMEM/F12培养基的培养皿中培养。8-10周后去除植片并以0.25%胰酶消化细胞，改用星形胶质细胞选择性培养基 ，经过两次传代后，通过细胞形态学、GFAP、NCAM免疫荧光染色观察纯化培养的星形胶质细胞生长情况并进行鉴定。
结果 植片接种2-3周后可观察到有细胞相继从植片边缘爬出，迅速向周围分裂生长，其移形过程明显。胰酶消化后细胞的形态多呈扁平星形或多角形，也可见长梭形细胞。改用星形胶质细胞选择性培养基并传代后，细胞几乎均呈扁平星形，并表达GFAP和NCAM。
结论 精确的分离出筛板组织，并将小植片定位于培养液边缘以利于其贴壁是能获得人原代星形胶质细胞的前提和关键步骤;星形胶质细胞选择性培养基对获得纯化的原代星形胶质细胞是非常有效且简便的。 | 
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）