目的 研究PDE4B抑制剂Rolipram调控人巩膜成纤维细胞(human scleral fibroblasts, HSF)胶原合成;
方法 体外培养HSF,取3~5代的细胞,用PDE4B抑制剂Rolipram、TGF-β2以及Rolipram+TGF-β2联合刺激HSF后,检测HSF细胞上清中总可溶性胶原以及胶原I,III,V mRNA的变化,同时检测可能的信号通路;此外,应用相关的信号通路拮抗剂干扰细胞,检测HSF胶原I,III,V mRNA的变化。
结果 1、Rolipram单独作用不引起HSF总可溶性胶原和胶原I,III,V mRNA的改变;2、10 ng/ml TGF-β2刺激HSF总可溶性胶原和胶原I,III,V mRNA的表达;3、10 μM Rolipram可以抑制由TGF-β2介导的胶原合成;4、Rolipram抑制TGF-β2介导的胶原合成可能通过ERK1/2介导的信号通路。
结论 PDE4B抑制剂Rolipram通过ERK1/2信号通路抑制人巩膜成纤维细胞中TGF-β2介导的胶原合成。 |