目的 建立豚鼠形觉剥夺性近视眼动物模型,观察多巴胺转运蛋白、多巴胺及碱性成纤维细胞生长因子在视网膜色素上皮中的表达。
方法 随机选取三周龄豚鼠30只,分为3组, A组:未行干预作为正常对照组;B组:右眼采用半透明自制眼罩遮盖2周;C组:右眼采用半透明自制眼罩遮盖1周,去遮盖1周。对各组进行视网膜检影测屈光度、A超测量眼轴及角膜曲率计测量角膜曲率。采用免疫组织化学法检测多巴胺转运蛋白在视网膜的表达定位,RT-PCR检测多巴胺转运蛋白mRNA的表达,Western blot法检测多巴胺转运蛋白及碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达及高效液相色谱-电化学法检测多巴胺的含量。
结果 平均屈光度A组为+0.917±0.303 D,B组为-3.541±0.579 D,C组为+0.750±0.223 D;B组与A组差异有统计学意义(P﹤0.05),其余各组差异无统计学意义(P﹥0.05)。眼轴长度A组为6.663±0.176 mm,B组为8.045±0.318 mm,C组为6.767±0.118 mm;B组与A组比较差异有统计学意义(P﹤0.05),其余各组差异无统计学意义(P﹥0.05)。各组实验眼角膜曲率差异无统计学意义(F=0.583,P﹥0.05)。多巴胺转运蛋白主要表达于视网膜色素上皮层,脉络膜中无表达;在B组呈强阳性表达,在其余各组呈阳性表达;B组多巴胺转运蛋白免疫反应增强主要表现在视网膜色素上皮。豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜色素上皮多巴胺转运蛋白及多巴胺较正常眼表达上调(P﹤0.05),碱性成纤维细胞生长因子较正常眼表达下调(P﹤0.05)。多巴胺转运蛋白的表达水平与免疫组织化学的反应强度呈密切正相关(r=0.893,P﹤0.05);多巴胺转运蛋白的表达水平与多巴胺含量呈密切正相关(r=0.902,P﹤0.05);多巴胺转运蛋白与碱性成纤维细胞生长因子的表达水平呈密切负相关(r=-0.976,P﹤0.05)。
结论 1. 多巴胺转运蛋白、多巴胺及碱性成纤维细胞生长因子在豚鼠视网膜色素上皮均有表达;多巴胺转运蛋白在脉络膜中无表达。2.豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜色素上皮多巴胺转运蛋白表达上调,碱性成纤维细胞生长因子表达下调;多巴胺转运蛋白与碱性成纤维细胞生长因子的表达水平呈密切负相关。 |