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去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠下调缺血再灌注损伤后视网膜中caspase3的表达           ★★★
去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠下调缺血再灌注损伤后视网膜中caspase3的表达
作者:张珍珍 文章来源:上海交通大学附属上海市第一人民医院眼科 点击数:250 更新时间:2011/9/13

目的 本实验通过拟通过去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠VPA对Wistar大鼠视网膜缺血再灌注损伤后组织中半胱氨酸天冬氨酸酶activated-caspase3表达的下调,并且通过免疫荧光方法观察视网膜石蜡切片中activated-caspase3阳性细胞数量的变化,探讨去乙酰化抑制剂丙戊酸钠在视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。
方法 将36只健康Wistar大鼠作为研究对象,随机分为假手术组(只灌注不加压,6只)、缺血再灌注组(灌注加压,10只),缺血再灌注+丙戊酸VPA组(10只)、丙戊酸钠VPA组(10只)。造模前一天皮下注射丙戊酸钠(300 mg/kg[
5],12h/次)(sigma)或等量的平衡盐溶液PBS,通过前房升高大鼠眼内压方法制作视网膜缺血再灌注损伤模型, Westernblot方法观察缺血后24小时后大鼠视网膜组织中半胱氨酸天冬氨酸酶activated-caspase3表达的变化;通过视网膜石蜡切片免疫荧光方法,显微镜下观察缺血再灌注后24h视网膜组织中activated-caspase3阳性细胞数量的改变。
结果 与假手术组相比,缺血再灌注组24h后视网膜组织中activated-caspase3表达升高(P<0.05),去乙酰化酶抑制剂丙戊酸VPA干预的缺血再灌注视网膜组织中activated-caspase3表达较单纯模型组明显降低(P<0.05);荧光显微镜下观察视网膜石蜡切片示:假手术组中未见activated-caspase3阳性细胞,缺血再灌注后24h后视网膜组织activated-caspase3阳性细胞数量较假手术组明显增多,VPA干预的缺血再灌注视网膜较单纯模型组视网膜组织activated-caspase3阳性细胞数量明显减少,丙戊酸钠VPA组未见activated-caspase3阳性细胞。
结论 去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠VPA可通过下调凋亡基因activated-caspase3的表达减轻视网膜缺血再灌注损伤。

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