目的 紫外线照射导致的氧化损伤是晶状体上皮细胞凋亡的原因之一,而小窝蛋白(Caveolin)参与晶状体上皮细胞凋亡过程。本实验拟研究紫外线造成的氧化损伤中Caveolin-1表达变化与晶体上皮细胞凋亡之间的关系,同时探讨阿司匹林作为抗氧化剂对Caveolin-1表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响。
方法 UVB(4.43mw/cm2)照射人晶状体上皮细胞系SRA01/04(0s,5s,10s,20s), 按照是否加入阿司匹林分为实验组和对照组。分别检测实验组和对照组细胞活性;产生ROS量;iNOS的含量;利用AnnexinV-EGFP法检测细胞凋亡率;real time RT-PCR方法定量分析Caveolin-1 mRNA的量随照射剂量不同,及加入抗氧化剂前后所产生的变化。
结果 随紫外线照射时间延长,单纯紫外线照射组细胞活性下降,iNOS含量降低,ROS量及细胞凋亡率增加,Caveolin-1mRNA表达量下降。加入阿司匹林后,各组ROS产生量降低,细胞活性增加。5s,10s组细胞凋亡率较对照组下降,Caveolin-1 mRNA的表达量较对照组升高 (P<0.05) 。但是照射20s的条件下,加药后的细胞凋亡率及Caveolin-1 mRNA的表达量较未加药组无变化(P>0.05)。
结论 紫外线照射可产生ROS造成人晶状体上皮细胞凋亡, Caveolin-1mRNA表达量减少,推测Caveolin-1表达量的变化可能与凋亡有关。低剂量的阿司匹林(3μM)可以在一定程度上减少UV照射造成的晶状体上皮细胞凋亡,增加Caveolin-1的表达;但大剂量的阿司匹林(>30μM)会起到相反的作用,因此找到一个合适安全的剂量范围具有一定临床意义。 |