目的 研究复方苦参注射液(岩舒注射液)对体外培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cels,HLECs) 增殖的影响及其作用机制。
方法 用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术测定细胞周期;RT-PCR方法测定细胞周期蛋白CyclinE和细胞周期蛋白激酶抑制因子P21的mRNA的表达;并运用Western blotting方法检测细胞周期蛋白CyclinE和细胞周期蛋白激酶抑制因子P21的蛋白的表达。
结果 MTT显示复方苦参注射液对体外培养的人晶状体上皮细胞的增殖具有抑制作用,并且表现为时间(24h、48h、72h )和剂量(0-60 ug/L)的依赖关系。流式细胞术检测发现复方苦参注射液可阻滞人晶状体上皮细胞由G0/G1期向S期转换,使G0/G1期细胞堆积增多,S期细胞减少。RT-PCR检测发现复方苦参注射液可抑制CyclinE mRNA的表达,促进P21 mRNA的表达;Western blotting检测发现复方苦参注射液可抑制CyclinE 蛋白的表达,促进P21蛋白的表达。
结论 复方苦参注射液可改变细胞的周期分布,影响细胞周期调控中CyclinE和P21的表达,抑制人晶状体上皮细胞的增殖。本研究主要为临床上后发性白内障的药物防治提供理论依据。 |