目的 评价酪氨酸蛋白激酶抑制剂对bFGF诱导的人晶体上皮细胞增殖的影响。
方法 人晶状体上皮细胞系SR01/04体外培养,根据是否加入酪氨酸蛋白激酶抑制剂分为实验组和对照组。两组均加入碱性成纤维细胞生长因子bFGF诱导人晶体上皮细胞的增殖。采用细胞计数法以及MTT比色法检测晶状体上皮细胞增殖的情况。用改良的Boyden室法和MTT比色法分别检测晶体上皮细胞的迁移和粘附。用western blot分析法和免疫荧光染色测定EMT标记的表达,确定晶体上皮细胞的间充质化。流式细胞仪检测酪氨酸蛋白激酶抑制剂对人晶状体上皮细胞周期的影响及凋亡的诱导作用。
结果 对照组中晶体上皮细胞表现出有活力的增生。表达EMT标记,α-平滑肌动蛋白,纤维连接蛋白等。用酪氨酸蛋白激酶抑制剂处理人晶体上皮细胞后,保持了其上皮细胞的形态,有效地抑制了细胞的增殖,附着,迁移和EMT化。所有的作用为浓度依赖性的,相比于对照组,没有发现毒性作用。流式细胞仪结果显示细胞凋亡率随浓度的增加而增加,也呈浓度依赖性。
结论 后发性白内障的发展与bFGF诱导的酪氨酸蛋白激酶磷酸化有关,酪氨酸蛋白激酶抑制剂能有效地抑制bFGF诱导的人晶体上皮细胞的增殖,阻滞后发障的发展。提示白内障术后应用酪氨酸蛋白激酶抑制剂可能是预防后发障的有效方法。 |