双氢杨梅树皮素诱导人视网膜母细胞瘤细胞氧化及凋亡的研究

目的通过检测藤茶中提取的中药单体成分双氢杨梅树皮素（APS）对体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株（HXO-RB₄₄）增殖的影响，观察细胞凋亡、线粒体跨膜电位、细胞内活性氧（ROS）的变化，探讨APS诱导人视网膜母细胞瘤（RB）细胞凋亡的氧化作用机制。
方法取对数生长期的人HXO-RB₄₄进行实验。观察7个不同APS浓度（50.00、33.33、22.22、14.84、9.90、6.60、4.40）μg/ml和空白对照组干预下细胞的生长曲线；MTT法、软琼脂克隆形成法观察7个浓度的APS对细胞增殖的抑制作用；AO/EB染色观察细胞凋亡形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；流式细胞仪检测线粒体跨膜电位及ROS的变化
结果 RB细胞的生长受到明显抑制，随着药物浓度的增高呈剂量依赖性，IC₅₀为14.71μg/ml；药物浓度为9.9μg/ml以上时单细胞克隆形成抑制率为100﹪；AO/EB荧光染色，药物作用后出现了明显的凋亡细胞；APS对细胞凋亡有明显的诱导作用，药物作用24h后的凋亡率分别为88.13％、58.46％、14.83％，各浓度的凋亡率与空白对照组（4.82％）比较，差异均有显著性(P<0.05)，各浓度的细胞凋亡率之间差异也均有显著性(P<0.05)；APS能明显降低RB细胞线粒体跨膜电位。APS处理24h后不同浓度组（50.00、14.84、4.40、0）μg/ml的平均荧光强度分别为20.70、55.63、88.57和146.53，药物组与空白对照组比较差别有统计学意义( P均< 0. 01)，三个浓度之间差异有统计学意义( P < 0. 01)；APS能促进RB细胞内ROS的产生。APS处理24h后不同浓度组（50.00、14.84、4.40、0）μg/ml的平均荧光强度分别为54.87、43.03、36.80和20.93，药物组与空白对照组比较差别有统计学意义( P均< 0. 01)，三个浓度之间差异有统计学意义( P < 0. 01)。
结论 APS对RB细胞的体外增殖有明显的抑制作用，APS可诱导体外培养的RB细胞凋亡，APS诱导RB细胞凋亡与线粒体内跨膜电位的下降、细胞内ROS产生增加有关。