目的 探讨1.8GHz手机微波致人晶状体上皮细胞株SRA01/04损失后α-晶状体蛋白的表达及其对损失修复的保护机制;
方法 体外培养人晶状体上皮细胞株SRA01/04及转染的人pGC-FU-αAC- SRA01/04 细胞,分为辐照组和假照组,置于细胞辐照(217Hz脉冲调制的1.8GHz微波)系统内连续辐照4小时后,分别运用流式细胞仪、Western Blot、免疫共沉淀和RT-PCR分析人晶状体上皮细胞的凋亡、α-晶状体蛋白的表达及其与p53蛋白的相互作用情况。
结果 研究发现假辐射组人晶状体上皮细胞株SRA01/04即有αA-和αB-晶状体蛋白的表达;1.0 mW/cm2组微波辐射4h后即刻和辐射后修复2h,细胞内αA-和αB-晶状体蛋白的表达开始轻度升高,分别与相应假辐射组进行比较无显著性差异 (P>0.05,n=4 );而2.0 mW/cm2组微波辐射后细胞内α-晶状体蛋白的表达量在辐射后升高最为明显,分别是假辐射组的1.92±0.47 和 1.54±0.31倍,与相应假辐射组进行比较差异有显著性意义(P<0.05 n=4 )。微波辐射≥5.0 mW/cm2时,α-晶状体蛋白的表达又开始下降,并使细胞的处于抑制增殖状态,细胞凋亡和坏死也明显增多;而转染的人pGC-FU-αAC- SRA01/04 细胞则损失较轻,细胞凋亡和坏死也明显减少。免疫共沉淀结果表明αA-和αB-晶状体蛋白与p53之间能发生相互作用,微波辐射后αA-和αB-晶状体蛋白与P53蛋白间的结合明显增强;
结论 α-晶状体蛋白对微波所致的人晶体上皮细胞的损失有修复保护作用,并通过P53抑制细胞凋亡的发生,从而使α-晶状体蛋白能发挥早期抗凋亡的细胞保护作用。 |