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硅油填充术后晶状体基因表达谱的变化及验证           ★★★
硅油填充术后晶状体基因表达谱的变化及验证
作者:刘冬梅 文章来源:济南施尔明眼科医院 点击数:278 更新时间:2011/9/13

目的 运用基因芯片技术研究玻璃体切割联合硅油填充术后晶状体的基因表达谱变化。
方法 健康成年Dutch Belted18,随机分为术后3天、1月、3月三组,每组6只,任一眼行玻璃体切割术后充填硅油,随机抽取6只未手术眼作为对照眼。在不同的时间点处死后取晶状体组织,提取总RNA,将纯化后的mRNA进行逆转录制备杂交探针,应用DNA芯片对晶状体的基因表达谱进行差异表达谱分析,并采用实时定量PCR进行验证。
结果 玻璃体切割硅油填充术后3天与对照组相比差异表达基因共有129条;上调基因为55条,其中己知基因40有条,ESTs15条;下调基因为 74 条,其中已知基因53条,ESTs21条。术后1月与对照组相比差异表达基因共有140 条;上调基因为 72条,其中己知基因59条,ESTs13条;下调基因为68条,其中已知基因50条,ESTs18条。硅油填充术后3月与对照组相比差异表达基因共134有条;上调基因为 75条,其中己知基因44有条,ESTs31条;下调基因为59条,其中已知基因49条,ESTs10条。硅油填充术后三组与对照组相比差异表达基因共有29条;上调基因为10条,其中己知基因有5条,ESTs5条;下调基因为19条,其中已知基因13条,ESTs6条。表达较高的基因是NPPACD38BPGM PINELAM1等基因;表达较低的的基因是VTNGSTM2BFSP2LTB4DHMMP2CAPNS1等基因。主要有氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、信号传导、细胞分化粘附等相关基因。RT- PCR与芯片检测结果具有相同的方向性,且数据非常接近。
结论 硅油填充术后并发性白内障的发生发展涉及多基因改变;RT- PCR进一步验证了基因芯片的可靠性。

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