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| Smad4对小鼠泪腺发育的影响 |
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作者：李海霞 文章来源：湖南长沙爱尔眼科医院 点击数：542 更新时间：2012/9/13 11:58:00 
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目的 Smad4是转化生长因子β（TGF-β）超家族分子信号通路的一个关键调节因子，在许多组织器官的正常发育中起重要作用，目前其在泪腺发育中的作用鲜有报道。我们利用Smad4条件性基因敲除小鼠模型探讨Smad4在泪腺失活后对其发育的影响。
方法 通过使用Pax6启动子驱动的Cre转基因小鼠和Smad4条件基因小鼠建立晶状体外胚层特异性Smad4条件基因敲除小鼠（C57BL/6小鼠系），失活Smad4在泪腺、晶状体、角膜和眼睑外胚层的表达，采用常规组织学方法观察其泪腺的形态学改变，同时Cre及Rosa26报道基因双转基因小鼠通过LacZ染色观察泪腺发育过程中与同龄野生型小鼠泪腺发育和形态的差别。每组至少使用6只同龄小鼠或小鼠胚胎进行比较。
结果 Le-Cre； R26R小鼠的X-gal染色表明在整个泪腺的胚胎发育中LacZ都可以表达，显示出泪腺的轮廓。出生小鼠的眶内和眶外泪腺均被X-gal染色所标记，且仅限于泪腺芽和腺管的上皮，在中胚层细胞并无显色（图1），表明Le-Cre转基因能有效删除泪腺上皮细胞基因组内侧接于Smad4基因的LoxP，从而达到条件性敲除Smad4的目的。LacZ染色显示， 与E15.0的野生型相比，同胎龄Smad4基因敲除小鼠胚胎仍可形成泪腺原芽，但其明显短小；E16.5的野生型泪腺芽已有分支，而变异型仍未见分支，仅前端变圆钝，至E18.0虽有分支并出现腺泡，但其分支、腺泡大小和数目均明显少于野生型（图2）；组织解剖学发现Smad4变异小鼠出生后其泪腺发育仍旧缓慢，表现为其腺体大小、分叶及腺泡数目均较同龄野生小鼠者显著减少，并自P7起出现渐进性增加的色素及脂肪堆积，至成熟期，腺体完全被脂肪组织和色素所取代（图3，图4）。
结论 Smad4对于小鼠泪腺的正常发育有着重要的作用，并可能影响腺体内色素和脂肪的代谢。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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