目的 探讨不同发育阶段正常小鼠和OIR小鼠视网膜中Claudin-3的动态表达及定位。 方法 用C57BL/6J乳鼠建立氧诱导视网膜病变(OIR)模型。P7、P12、P17、P25和 P40 提取正常小鼠和OIR小鼠视网膜组织RNA,行实时荧光定量PCR检测 Claudin-3 mRNA表达的动态变化。P7、P12、P17、P25和P40取正常小鼠和OIR小鼠视网膜行铺片和冰冻切片,Claudin-3分别与视网膜神经节细胞、星型胶质细胞、视网膜血管内皮细胞的特异性抗原Thy1.1、NF1 、GFAP和Isolectin双重免疫荧光染色,激光共聚焦扫描显微镜检测Claudin-3的空间分布特点和表达的动态变化。 结果 实时荧光定量PCR检测到在正常小鼠视网膜中Claudin-3 mRNA的表达在P12有个小峰值,而在OIR小鼠视网膜中Claudin-3 mRNA的表达在P17和P25明显升高,P40时又下降。免疫荧光显示Claudin-3与GFAP和Isolectin无共染,与Thy1.1和NF1共染。小鼠视网膜中Claudin-3均匀、广泛地分布于视网膜神经节细胞的胞体、轴突、树突和神经纤维,OIR小鼠视网膜中Claudin-3荧光强度在P17和P25明显增强。 结论 Claudin-3在小鼠视网膜中视网膜神经节细胞中表达,且在氧诱导的小鼠血管增殖性视网膜病变中表达增加,提示Claudin-3在视网膜神经节细胞的氧化损伤中具有重要作用,有待进一步深入研究。 |