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15-脂氧合酶-1基因转移抑制小鼠视网膜新生血管的实验研究           ★★★
15-脂氧合酶-1基因转移抑制小鼠视网膜新生血管的实验研究
作者:黎智 文章来源:武汉大学人民医院 点击数:210 更新时间:2012/9/13
目的  观察15-脂氧合酶-115-LOX-1)基因转移对小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用及其对血管内皮生长因子-AVEGF-A)和血管内皮生长因子受体-2VEFGR-2)的影响。

方法  7日龄的60C57BL/6J新生小鼠随机分为正常对照组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、基因治疗组和空白干预组,每组15只。后3组小鼠置于(75±2)浓度的氧环境中饲养5d后,回到正常空气环境中建立OIR小鼠模型。基因治疗组小鼠在出生后第12天(12日龄)出氧箱时行玻璃体腔注射腺病毒载体15-LOX-1AD-15-LOX-1),空白干预组注射等量空白GFP腺病毒载体(AD-GFP)。出生后第17天(17日龄)各组小鼠行FITC-Dextran血管灌注荧光视网膜铺片观察视网膜血管变化。石蜡切片行苏木精-伊红染色,光学显微镜下观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数。荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应法检测小鼠视网膜15-LOX-1, VEGF-AVEGFR-2mRNA含量;蛋白质免疫印记法检测15-LOX-1, VEGF-AVEGFR-2的蛋白表达。

结果  视网膜铺片结果显示,基因治疗组较OIR模型组和空白干预组视网膜血管分布均匀,新生血管丛和无灌注区面积显著减少。基因治疗组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数与OIR模型组及空白干预组比较,差异有统计学意义(F=115.8P<0.001)。基因治疗组视网膜15-LOX-1mRNA和蛋白质水平较OIR模型组和空白干预组明显升高,同时VEGF-AVEGFR-2mRNA和蛋白质水平较OIR模型组和空白干预组明显下调。

结论  小鼠玻璃体腔15-LOX-1基因转移通过下调VEGF-AVEGFR-2的表达抑制氧诱导的视网膜新生血管形成。
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