目的:探索小鼠巩膜成纤维细胞体外培养的条件、方法,观察其体外生长规律和超微结构,为在细胞水平研究近视眼的发病机制提供体外模型。
方法:采用组织块培养法,无菌条件下取小鼠巩膜,剪成小块,接种到含10%胎牛血清及双抗的DMEM培养基中。三天换液一次,细胞80%汇合时,用0.25%胰蛋白酶消化传代。相差倒置显微镜下观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线,并取传四代的细胞行电镜观察。
结果:巩膜成纤维细胞在接种5天后从组织块长出,7天后传代。相差倒置显微镜下观察细胞形态呈梭形,胞浆丰富。电镜下可见线粒体嵴完整,较多的粗面内质网及核糖体。
结论:采用组织块培养法及DMEM培养基可以有效地建立小鼠巩膜成纤维细胞的体外模型,从而为在细胞水平研究近视眼发病机制打下基础。 |