目的 探讨1.8GHz微波辐射对体外培养的人晶状体上皮细胞蛋白表达的影响。
方法 体外培养人晶状体上皮细胞（hLECs）置于sXc-1800细胞辐照系统（发射217Hz脉冲调制的1.8GHz微波）内连续辐照2小时，辐照组辐照强度（specific absorption rate，SAR）为4W/kg，假辐照为0 W/kg。辐照后立即提取全蛋白裂解液，经过溶液内酶解所得样本直接进入Ettan多维液相色谱系统进行分离，而后通过LTQ-Orbitrap质谱仪进行质谱分析。运用化学计量法对质谱结果做相对定量分析，比较辐照前后蛋白质表达谱差异，筛选出微波辐照相关标志性蛋白。运用实时定量RT-PCR技术在转录组水平进一步对质谱分析的结果进行筛选。人晶状体上皮细胞分别接受SAR分别为2,3,4 W/kg的1.8GHz手机频率微波连续辐照2小时，提取总蛋白后用Western blot试验对上述筛选出的标志性蛋白进行验证。
结果 鸟枪法蛋白质谱比较分析提示4W/kg的微波辐射组与假辐照组之间人晶状体上皮细胞蛋白质表达谱存在差异。8个差异蛋白经过质谱分析和化学计量法统计，获得初步鉴定。实时定量RT-PCR结果显示VCP，USP35和SRP68的mRNA表达辐照组与假辐照组之间有明显差异（P<0.05）。Western blot试验显示4W/kg和3W/kg的微波辐射2小时组VCP和USP35蛋白表达明显高于假辐照组（P <0.05），SRP68蛋白表达明显低于假辐照组（P<0.05），但2W/kg辐照组与假辐照组之间这3个蛋白的表达均无明显差异（P>0.05）。
结论 鸟枪法蛋白质谱分析是筛选人晶状体上皮细胞微波辐照相关差异蛋白表达的有效方法。微波辐射可导致人晶状体上皮细胞蛋白质表达谱发生改变。经验证的3个蛋白中VCP和USP35可能参与了微波辐照所致人晶状体上皮细胞蛋白质表达质量控制过程，SRP68的改变提示微波辐照对蛋白分泌有影响。