目的:分离并标记人小梁网干细胞,研究其向小梁网(TM)细胞分化的潜在能力。 方法:通过荧光细胞分离或克隆培养的方法可获得人小梁网干细胞 (TMSC)。采用免疫染色和定量RT-PCR方法比较原代和传代TMSC。流式细胞仪检测 TMSC 纯度,并诱导TMSC向神经细胞,脂肪细胞,角膜基质细胞和TM细胞转化检测其多能性。定量 RT-PCT,免疫染色和免疫印迹方法检测不同基因表达。采用未激活金黄色葡萄球菌生物微粒对TM细胞进行吞噬功能测试。 结果: 侧群细胞和分离克隆细胞表达干细胞标记物ABCG2, Notch1, OCT4, AnkG 和 MUC1,未表达TM细胞标记物AQP1, MGP, CHI3L1 或TIMP3。传代TMSC 具有同源性, 95% 细胞阳性表达CD73, CD90, CD166 或Bmi1。MSC具有多能分化能力,可分化为多种细胞,包括表达神经标记物神经丝蛋白,β-微管蛋白 III, GFAP的细胞;表达角膜基质细胞特异标记物硫酸角质素和角膜蛋白聚糖的细胞,或表达脂肪细胞标记物ap2和Leptin的细胞。TMSC可分化为TM细胞,具有吞噬功能,并表达TM标记物AQP1, CHI3L1 和TIMP3。 结论: TMSC作为侧群细胞或克隆细胞可表达特异干细胞标记物,具有同源性和多能分化能力,可分化为吞噬TM细胞。此细胞为青光眼干细胞治疗提供了可能性。
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