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AQP4基因敲除小鼠PERG的变化及激光诱导其高眼压模型的建立           ★★★
AQP4基因敲除小鼠PERG的变化及激光诱导其高眼压模型的建立
作者:钱朝旭 文章来源:常州市第三人民医院 点击数:244 更新时间:2012/9/13
目的 使用图形视网膜电流图(PERG评估野生型(wide type, WT)小鼠和水通道蛋白4aquaporin4, AQP4)基因敲除(knock out, KO)小鼠(CD1背景鼠)视网膜神经节细胞(RGC)的功能。通过激光光凝角膜缘和巩膜上静脉的方法,观察AQP4在高眼压模型下对眼压变化的影响,建立水通道蛋白4基因敲除小鼠的高眼压模型。
方法 1. AQP4 基因敲除小鼠和野生型小鼠各18只,水合氯醛腹腔注射麻醉,采用自制电极测量各小鼠的图形视网膜电流图,对结果进行统计分析。2. 使用532 nm二极管激光光凝角膜缘和巩膜上静脉的方法制作AQP4基因敲除小鼠和野生型小鼠的高眼压模型,使用IcareLAB回弹式眼压计测量小鼠术前及术后的眼压值,观察AQP4基因敲除小鼠和野生型小鼠各自眼压的变化情况。
结果 1. AQP4基因敲除小鼠(n=18)图性视网膜电流图的P50振幅(5.53±1.31uVN95振幅(7.71±1.89uV。野生型小鼠(n=18)的P50振幅(8.14±1.24uVN95振幅(11.30±2.61uVAQP4基因敲除小鼠的P50N95的振幅较野生型小鼠的低(P0.01),潜伏期也较野生型小鼠的提前。2. AQP4基因敲除小鼠(18只鼠36眼)光凝手术前平均眼压(6.61±0.90mmHg,野生型小鼠(18只鼠36眼)光凝手术前平均眼压(7.31±0.98mmHg基因敲除小鼠和野生型小鼠之间的基础平均眼压值存在微小但有统计学意义的差异(P0.05)。光凝手术后AQP4基因敲除小鼠(n=18)和野生型小鼠(n=18)的眼压值均在术后第1 d上升到最高点,达基础眼压的两倍多,KO14.78±1.80mmHgWT16.44±1.46mmHg。之后两种小鼠的眼压值均逐渐降低,在第8 d时基本降至术前基础眼压水平。
结论 1. 图形视网膜电流图能很好地反应小鼠视网膜神经节细胞的功能,AQP4基因缺失可能直接破坏了小鼠的RGCs功能,对小鼠的视网膜电生理功能产生了不良影响。2. 采用532 nm二极管激光光凝角膜缘和巩膜上静脉的方法可以使AQP4基因敲除小鼠和野生型小鼠的眼内压短时间升高,成功制作了新的青光眼动物模型。未来的研究可能通过抑制AQP4在睫状体非色素上皮细胞的表达而寻求到新的降低眼内压的方法。
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