目的 探讨羊膜提取液对苯扎氯铵诱导的小鼠干眼动物模型的治疗作用及机制。 方法 苯扎氯铵诱导建立小鼠干眼动物模型后,使用两种浓度(100或200微克/毫升)羊膜提取液局部滴眼治疗(3次/日),并设空白对照及溶剂对照。治疗第0、3、6天行临床观察,包括泪膜破裂时间、角膜荧光素染色、炎症指数及泪液分泌试验,并于第6天收集眼组织标本行以下病理及生化检测:角膜H&E染色观察组织形态及炎症浸润、TUNEL试验观察角膜上皮细胞凋亡、PAS染色计算杯状细胞数量、免疫标记法观察与鳞状上皮化生相关的角蛋白K10及在细胞分裂期出现的Ki-67,并用Western blot测定角膜K10、肿瘤坏死因子TNF-α表达水平。 结果 上述两种浓度的羊膜提取液均可显著延长泪膜破裂时间、降低角膜荧光素染色评分及炎症指数。羊膜提取液还可减少干眼状态下的角膜炎症细胞浸润、细胞凋亡、K10表达及TNF-α水平,减少结膜杯状细胞丢失,增加角膜Ki-67阳性细胞数量。同时在体外实验中发现,羊膜提取液可促进人角膜上皮细胞系HCE细胞的增殖。 结论 羊膜提取液可通过稳定泪膜、维持角膜上皮完整、抑制眼表炎症而减轻干眼的临床表现。此外,干眼中出现的上皮细胞凋亡、杯状细胞减少、角膜鳞状上皮化生等病理改变可得到逆转。综上所述,羊膜提取液有望用于伴有病理改变的中重度干眼的临床治疗。 |