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| 高通量筛选青光安有效组份抗青光眼术后滤过道瘢痕化的实验研究 |
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作者：谭涵宇 文章来源：湖南中医药大学第一附属医院 点击数：205 更新时间：2012/9/13 
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目的 在前期筛选系统建立的基础上，筛选出青光安药物有效组份，并检测TGF-β1、Smad3表达和TGF-β1、Smad3 mRNA表达，探讨其有效组份抗滤过道瘢痕化的作用。
方法 选用青光安颗粒剂，利用前期所建立基于TGF-β1/Smad3高通量筛选体系进行筛选，先将TCFS-ZsGreen1DR细胞株复苏，复苏后的细胞株放入24孔板进行分组培养，分组为空白组，阴性对照组，阳性对照组，加药组，各组滴加TGF-β1之后在12h的时相点荧光显微镜下观察细胞荧光，荧光照片采用彩色病理图文分析系统中的荧光表达测量系统，测量ZsGreen1-DR激发荧光的平均光密度值，比较得到结果最优的4种有效组份。选取健康成年新西兰长耳白兔42只，体重1.8-2.2kg，雌雄不论。将兔子随机分为7组，每组6只兔。分别为：空白组、模型组、有效组份1组、2组、3组、4组、MMC组。将后六组实验动物兔眼行常规小梁切除联合虹膜根部切除术；有效组份1组在术中联合应用MMC ；空白组不做任何处理。各组在造模后第2天开始用药。用药4周后处死各组动物,取术眼滤过道全层组织，用western- blot检测TGF-β1、smad3蛋白表达，RT-PCR检测TGF-β1、Smad3 mRNA 表达。
结果 药物筛选出来的4种有效组份，在TCFS-ZsGreen1DR细胞实验中以有效组份2-1-B-1抑制TGF-β1效果最为明显，与其他三组比较有显著性差异。Western-blot 结果显示，正常组有较少TGF-β1、smad3表达，模型组的表达明显增强，与模型组相比，有效组份1-4组与MMC组TGF-β1，Smad3 表达显著减少。RT-PCR 结果显示，正常组都有较低水平的表达，而模型组TGF-β1、Smad3 mRNA 表达显著增强，与模型组比较，有效组份1-4组与MMC组TGF-β1、Smad3表达减少，比较有差异性；有效组份2组与MMC组比较差异无统计学意义，其他有效组份组与MMC组比较差异有统计学意义。
结论 在细胞实验中通过筛选出来的有效组份能有效抑制TGF-β1，下调TGF-β1 和Smad3 蛋白在组织表达，抑制瘢痕组织中TGF-β1 和Smad3 mRNA 基因表达，从而调控TGF-β/Smad信号转导通路发挥抗滤过道瘢痕化的作用，且以有效组份2抗滤过道瘢痕化效果最优。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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