目的 对高分子脂质体（PL）行表征分析，观察其细胞毒性、不同细胞的转染效率、动物模型中的穿膜力和缓释性。
方法 1. 探讨Tat化的羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐PL作为基因载体对质粒的最优转染条件，绘制释放曲线，检测其细胞毒性。2. 转染缺氧的RPE，收集细胞上清经ELISA法检测VEGF变化；细胞爬片行免疫组化分析VEGF蛋白表达，采用Real-time PCR检测各组VEGFmRNA的变化。3. 建立ROP小鼠模型，行玻璃体腔注药，于不同时间视网膜铺片，观察GFP的表达情况；鼠心脏灌注后行视网膜铺片观察视网膜血管形态变化；HE染色，统计新生血管内皮细胞核；冰冻切片来反映高分子脂质体携带质粒的穿膜能力。
结果 1. 纳米粒平均粒径134nm，Zeta电位+39.64mV，呈均匀的圆形粒子。前5天约75％的质粒释放；此后至第14天呈稳态缓释。该PL毒性低，最高安全浓度为20ug/mL。2. 筛选出PL与质粒质量比≥2:1时、混合时间为30分、无血清时为最优转染条件；对RPE、Hela及RF/16，转染率分为66%，49%，80%。3. ELISA显示PL组和Lipo组VEGF含量均降低，差异较模型组有显著性；细胞免疫组化示Lipo组和PL组对VEGF表达产生明显的抑制作用；Real-time PCR表明在PL和Lipo组VEGF mRNA得到了明显的抑制。4. 视网膜铺片见PL组注药后第1天即有GFP表达，第6天为高峰，第11天时仍有GFP表达，Lipo组不明显。心脏灌注视网膜铺片显示视网膜无灌注区及新生血管于PL组及Lipo组均有改善； HE表明P17天时PL组及Lipo组均能有效抑制新生血管生成，P22天时，PL效果仍能显现。冰冻切片观察到注射后第11天，在PL组切片中仍有GFP的表达，但在Lipo组几无。WB示注射后6天，PL组与Lipo组抑制效果相当；P22时PL组较Lipo组明显。Real-time PCR示P17时，PL组和Lipo组VEGFmRNA明显抑制，Lipo组更低， P22时，PL组明显，但统计学差异均无显著性。
结论 1. Tat化的PL粒径均匀、分散性好、Zeta电位高、细胞毒性小，能在较短时间达到治疗浓度，并可缓慢释放。2. 可高效转染RPE、Hela及RF/16，效率与商品化的Lipo相当。3. 具有明显的穿膜能力及体内缓释功能，能维持较长时间。