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| 人视网膜母细胞瘤细胞ATOH7转染诱导分化及其在青光眼模型小鼠中的应用 |
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作者：刘颖 文章来源：中山大学中山眼科中心 点击数：215 更新时间：2012/9/13 
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目的 本研究旨在研究ATOH7体外转染对人视网膜母细胞瘤细胞的分化调控作用，探索人视网膜母细胞瘤细胞(human retinoblastoma cells,hRBCs)的干细胞特性和分化潜能；并通过RBCs源性视网膜神经节样细胞（retinal ganglion like cells, RGC-like cells）行青光眼模型小鼠眼内移植，观察移植细胞在宿主体内的迁移和整合，探索青光眼视网膜神经元损伤后替代治疗的新途径。
方法 通过D-L诱导法，并添加b-FGF等细胞因子，联合X-treme HP载体携带ATOH7基因转染人视网膜母细胞瘤细胞系（RBCs）使其高表达ATOH7，诱导RBCs分化成为视网膜神经节样细胞（RGC-like cells），免疫荧光、RT-PCR等检测细胞分化情况；将RBCs源性视网膜神经节样细胞植入DBA/2J小鼠玻璃体腔，免疫组化检测细胞的迁移和整合。
结果 1. ATOH7转染hRBCs重编程诱导分化的视网膜神经节样细胞生长出短细胞轴突，与视网膜神经节细胞的形态学表现有一定程度相似；2. 免疫荧光检测分析证实hRBCs来源的RGC-like细胞表达成体RGCs相关蛋白如Brn3b、Islet1、Syn、Map2与Thy1.2，并弱表达视网膜神经胶质细胞相关蛋白如GFAP；3.植入DBA/2J小鼠玻璃体腔的GFP-RGC-like细胞，少量迁移至DBA/2J小鼠凋亡的RGC细胞层，多数细胞聚集在注射部位，并表达Brn3b、Islet1、Syn、Map2与Thy1.2。
结论 1. 通过D-L诱导、细胞因子与ATOH7基因转染联合调控，可靶向诱导人视网膜母细胞瘤细胞转分化为视网膜神经节细胞样细胞；2. 视网膜母细胞瘤细胞源性视网膜神经节样细胞可在DBA/2J小鼠视网膜中存活并与宿主细胞实现初步整合。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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