目的 硫柳汞（Thimerosal，Thi）是一种在眼科制剂中广泛应用的防腐剂。本研究旨在研究Thi对体外培养的角膜上皮细胞的基因毒性，以及人工泪液替代物透明质酸(Hyaluronic Acid，HA)和羟丙基甲基纤维素(Hydroxypropyl methylcellulose，HPMC)对角膜细胞的抗氧化保护作用。
方法 将细胞分为3组，一组采用浓度分别为0.00001%、0.00005%、0.0001%、0.0005% 及0.001% 的Thi单独处理30min，另两组分别用0.3% HA 或者0.3% HPMC预处理30分钟再给予相同的Thi处理。用MTT法检测细胞存活率，碱性彗星实验和免疫荧光法检测细胞核内磷酸化的H2AX（γH2AX）焦点检测DNA损伤，以乙酰乙酸双氯荧光素（DCFH-DA）为探针，应用流式细胞仪检测细胞内ROS水平。
结果 MTT结果表明，使用0.001% Thi处理30分钟后，细胞生存率出现明显下降。各个浓度引起的DNA单链或双链断裂呈现浓度依赖效应。Thi引起细胞内ROS水平升高也基本呈剂量效应，与DNA损伤不同的是，0.001% 组产生的ROS水平较0.0005% 组低，这可能和细胞生存率的下降有关。然而，细胞用0.3% HPMC或0.3% HA预处理30分钟后，与单独Thi处理组比较，可以显著提高细胞生存率，降低DNA损伤以及细胞内ROS水平，且HA的抗氧化细胞保护作用要优于HPMC。
结论 Thi可引起角膜上皮细胞DNA损伤，氧化应激可能为其机制。HA以及HPMC具有抗氧化作用，可抑制Thi引起的DNA损伤，从而可在泪液替代成分的作用之外发挥眼表保护作用，且HA的保护作用要优于HPMC。