目的 探讨角膜缘损伤模型静脉移植兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,以下称MSCs)其体内动态分布特点; 方法 选用2.5公斤,月龄2月的新西兰大白兔60只,入笼养至7天。随机(查表法)分为两组,每组30只,正常兔作为正常对照组,角膜缘碱烧伤兔(制备右眼)作为实验组。分别进行静脉移植骨髓间充干细胞,观察动物进食、休息状态、行为、大小便,是否有腹泻、毛色变化、脱毛等;观察眼部是否有睑球粘连、感染。分别于细胞移植后第3、21、60天耳缘静脉抽取2毫升外周血,后空气栓塞处死兔(每组每次处死6只),将眼、肺、心、肝、脾、肾和肌肉脑作冰冻切片,片厚4μm。 结果 正常对照组,移植术后第3天,外周血中的骨髓间充质干细胞细胞数目较低(0.86±0.05),与第21、60天相比,其变化值没有显著性差异 (P>0.05);角膜缘碱烧伤组,移植术后第3天,外周血中的骨髓间充质干细胞数量较高(2.56±0.11),与第21、60天相比,其变化值有显著性差异(P<0.05),且移植骨髓间充质干细胞的起始数量与外周血中第3天的流式细胞学检测结果呈正相关(r=0.567;P<0.05)。角膜缘碱烧伤组移植术后第3、21、60天(2.56±0.11;2.98±0.09;1.74±0.07),与正常对照组(0.86±0.05;0.65±0.07;0.54±0.04)相比较,均有显著性差异(P<0.05);观察到外源性骨髓间充质干细胞迁移至眼,数量由多至少依次为角膜缘、角膜中央、结膜、视网膜、脉络膜、虹膜;且在角膜缘分布有“聚集现象”;骨髓间充质干细胞经静脉移植后,心、肝、脾肺、肾、肌肉、脑均可见到分布。移植后第3天,器官组织中骨髓间充质干细胞数量由多至少依次为肺脏(17个/视野)、脾脏(10个/视野)、肾脏(5个/视野)、肝脏(4个/视野)、肌肉(2/视野)、心脏(1个/视野)、脑(0个/视野)。移植术后不同时间,肺脏骨髓间充质干细胞数量变化有显著性差异(P<0.05);脾脏组织中骨髓间充质干细胞数量变化没有显著性差异 (P>0.05)。 结论 在角膜损伤修复过程中,静脉移植骨髓间充质干细胞可归巢至角膜损伤部位,在全身实质脏器中均有分布,肺组织是主要截流场所,脾脏是骨髓间充质干细胞破坏与溶解场所。 |