目的 观察重组腺病毒-p21(rAd-p21)对氧诱导小鼠视网膜新生血管(RNV)的抑制作用。 方法 将56只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机平均分为四组:对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、rAd-p21组及rAd-NC组,每组14只。其中PBS组、rAd-p21组及rAd-NC组小鼠按照Smith法建立氧诱导视网膜新生血管模型,并于11日龄时玻璃体腔内分别注入PBS、rAd-p21及rAd-NC 1ul。对照组不做任何处理。17日龄时,每组选取6只小鼠分别制作荧光视网膜铺片和切片,观察小鼠视网膜新生血管发生情况;同时选取8只小鼠提取视网膜总RNA和总蛋白,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(Western blot)检测p21 和CDK2 mRNA及蛋白在视网膜组织中的表达。 结果 rAd-p21组视网膜无灌注区及新生血管较PBS组和rAd-NC组明显减少。rAd-p21组视网膜组织p21 mRNA及蛋白表达较其余三组显著增高(F=839.664,F=509.817;P=0.000,P=0.000),而CDK2 mRNA及蛋白表达较其余三组显著降低(F=301.858,F=592.882;P=0.000,P=0.000)。 结论 重组腺病毒介导p21可通过上调p21的表达而降低CDK2的表达,抑制视网膜微血管内皮细胞增生,达到抑制RNV的作用。 |