目的 探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)所致的成年大鼠视网膜毒性模型的神经保护作用。 方法 171只雌性Wistar大鼠,随机分为四组:正常对照组(A组,n=9),玻璃体腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)组(B组,n=54),玻璃体腔注射NMDA+腹腔注射生理盐水组(C组,n=54),玻璃体腔注射NMDA+腹腔注射EGCG组(D组,n=54)。腹腔注射在玻璃体腔注射之前2天开始,EGCG注射剂量为25mg/kg/天。在玻璃体腔注射后12小时,1天,2天,3天,1周,2周这6个时间点处死大鼠并取材。制作视网膜冰冻切片,HE染色计算视网膜神经节细胞层(GCL)神经元密度,Thy-1免疫荧光染色测量Thy-1免疫荧光染色阳性区域厚度。实时荧光定量聚合酶链反应(Real time Quantitative PCR,RQ-PCR)检测Thy-1的mRNA表达量。 结果 在玻璃体腔注射NMDA后12小时,1天,2天,3天,1周,2周这6个观察时间点,B组视网膜神经节细胞层神经元密度分别与A组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。在各观察时间点,C组的视网膜神经节细胞层神经元密度、Thy-1免疫荧光染色阳性区域厚度、Thy-1的mRNA表达量均显著低于B组(P<0.05),且明显低于D组(P<0.05)。此外,在C组和D组中,视网膜神经节细胞层神经元密度、Thy-1免疫荧光染色阳性区域厚度、Thy-1的mRNA表达量有随时间进展逐渐减少的趋势。 结论 腹腔注射EGCG可以明显减少NMDA所致的RGC损伤,提示EGCG对RGC具有一定的保护作用。 |