目的 通过克隆培养方法，建立体外纯化培养大鼠视网膜müller细胞的培养体系。
方法 钝性分离出生后4-5天SD (Sprague–Dawley)大鼠视网膜，原代外植法培养视网膜贴壁细胞，反复胰酶消化法初步纯化培养müller细胞，微孔板克隆培养法进一步纯化培养müller细胞；通过光镜观察，免疫细胞化学-免疫荧光法检测谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase, GS）对müller细胞进行鉴定。
结果 原代接种后视网膜组织块于第1天开始贴壁，第3天组织块边缘可见不规则细胞呈放射状爬出，反复胰酶消化后神经样细胞比例逐渐减少，细胞形状渐趋均一，进一步利用克隆培养的方法可于2周左右纯化培养视网膜müller细胞。müller细胞胞体呈三角形，或不规则形，两端伸出较长突起，细胞融合后呈梭形，免疫细胞化学染色可见GS表达阳性，GS阳性信号于细胞胞核和胞质中均可见，且胞核表达明显强于胞质。神经元特异性标志物Thy1.1在纯化培养的müller细胞中呈阴性表达。
结论 克隆培养法简单易行获得纯化的müller细胞。经克隆法纯化培养的müller细胞具有与在体müller细胞相似的形态学与生物学特性，解决了培养中异质性问题，为离体研究müller细胞在视网膜正常生理及病理状态下的作用提供了较好的实验材料。