目的 筛选并初步鉴定与糖尿病性视网膜病变关系密切的microRNA。
方法 利用构建的大鼠糖尿病性视网膜病变模型及高糖刺激内皮细胞模型，通过miRNA芯片方法筛选出正常视网膜组织与糖尿病性视网膜组织miRNA差异表达谱以及正常内皮细胞与高糖刺激内皮细胞miRNA差异表达谱；进一步通过Real-time PCR方法确定表达差异；结合生物信息学方法预测调控VEGF、PEDF的miRNA；综合以上信息筛选出与DR关系密切表达改变的miRNA作为候选miRNA；在培养的血管内皮细胞中上调和下调候选miRNA水平，观察候选miRNA对内皮细胞生长的影响。
结果 （1）成功建立STZ注射DM大鼠动物模型；（2）10w DM组VEGF mRNA的表达量增至CON组的6倍（P<0.001），PEDF mRNA1表达量降至CON组的1/3（P<0.001）；（3）miRNA芯片检测DM视网膜组织，和CON组比较，共有168个miRNAs的表达出现明显变化，有94个miRNAs表达显著上调；74个miRNAs表达显著下调。（4）25mmol/L的葡萄糖刺激内皮细胞后，其生长受到明显的抑制，生长活力为正常培养细胞的70%(p<0.01)（5）高糖刺激24和48小时后内皮细胞miRNAs的表达较正常对照有明显差异。综合分析共有115个miRNA显著变化(p<0.01),其中69个miRNA表达水平上调，46个miRNA表达水平下调。（6）经过生物信息学分析，6个目标miRNA预测多数靶基因与血管新生关系密切，miR-29c和miR-92b可能靶向与DR关系最为密切的VEGFa和PEDF； （7）增强miR-18b、miR-92b、miR-10a的表达，抑制miR-192、miR-194、miR-29c的表达，内皮细胞在高糖刺激下的生长得到明显的改善。
结论 STZ诱导的DM大鼠在病程10w时即已出现早期DR相关改变；早期BDR大鼠模型视网膜与高糖刺激内皮细胞miRNAs的表达谱较正常对照有明显差异变化；增强miR-18b、miR-92b、miR-10a的表达，抑制miR-192、miR-194、miR-29c的表达，对内皮细胞抵抗高糖刺激引起的细胞生长有重要调控作用；以上miRNAs可能调控与DR发生发展密切相关的基因。