目的 探讨小鼠角膜微囊袋法植入微粒体诱导新生血管的实验研究。 方法 将24只C57BL6小鼠(雌鼠,等体重)随机分为两组,每组12只,角膜囊袋法分别对空白对照组植入空白缓释微粒体及阳性对照组植入含200ng VEGF-A的缓释微粒体,术后1 d、3 d、5 d、7 d采用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管的生长情况,并测量其长度与面积。于术后3d,5d,7d,14d各组取3只小鼠处死并取术眼,行常规组织病理学检查,检测炎症细胞的浸润情况,应用血管内皮细胞特异性标记CD31行免疫荧光检测新生血管。 结果 小鼠角膜微囊袋内植入微粒体后,对照组术后3天可见少许新生血管从角膜缘长入,5天新生血管渐消退,7天新生血管全部消退。实验组小鼠角膜微囊袋内植入微粒体后1d角膜缘血管网充盈扩张,未见新生血管生长;3d实验组角膜缘可见毛刷状新生血管伸入角膜,面积为 (1.53 4±0.59)mm2;5d新生血管垂直于角膜缘向微粒体方向束状延伸,并达到微粒体下缘部位,面积为(5.214±1.23) mm2;7d新生血管继续向前生长,达到并超过微粒体下缘,部分新生血管顶端互相吻合成袢状,面积为(7.624±1.79)mm2。新生血管生长过程中均未见明显的白细胞侵润,所有术眼均未见前房积血、角膜溃疡、微粒体脱出等并发症。 结论 小鼠角膜微囊袋植入VEGF-A 微粒体建立的角膜新生血管模型、血管生长稳定且并发症少、适用于定量研究。 |