目的 评价不同浓度阿托品滴眼液在不同阶段对单眼形觉剥夺豚鼠的屈光发育的影响,并进一步检测各组豚鼠视网膜细胞对胰高血糖素的表达,来探讨阿托品抑制近视的可能机制。 方法 实验动物与材料:出生 3 周的幼年英国种短毛三色豚鼠共126只,每种浓度各42只。初始屈光度范围在 +2D~+7D,两眼屈光参差小于2D,随机分至5组:单眼形觉剥夺4周组(n=10)、形觉剥夺同时加点药4周组(n=10)、形觉剥夺2周加点药2周组(n=10)、单纯点药对照组(n=6)、点PBS对照组(n=6)。0.2%,1%,3%浓度阿托品溶液,均由阿托品粉剂溶于单蒸水配制。免疫荧光一抗:豚鼠胰高血糖素特异性抗体;二抗:CY3鼠抗。实验流程:各组分别在实验前、实验2 周、实验4 周时测量其屈光力、角膜曲率、眼轴长度等相关生物学参数。实验周期结束后取豚鼠眼视网膜做冰冻切片,免疫荧光法标记和计数豚鼠视网膜上表达胰高血糖素的细胞。 结果 1.三个浓度中,三组单纯形觉剥夺组,实验2周后,豚鼠实验眼相对于对侧眼屈光度均往近视方向发展,同时玻腔加深,眼轴延长,差异均存在统计学意义;4周后,差异更显著。2.形觉剥夺同时加点药组,实验2周后,实验眼屈光度与对侧眼比,均不存在统计学差异;同时实验眼玻腔深度、眼轴长度对侧眼比,也不存在统计学差异。实验4周后,各组实验眼与对侧眼比,屈光度开始向近视方向偏移,0.2%实验眼1.81±1.66D,对侧眼4.47±1.75D;1%实验眼2.77±1.07D,对侧眼6.70±0.91D;3%实验眼3.49±1.28D,对侧眼5.08±1.31D,均形成统计学差异,但3%浓度阿托品作用的实验眼近视偏移量较前两组小。同时,实验眼玻腔较对侧眼加深,但仅0.2%和1%浓度形成统计学差异,3%浓度无统计学差异;眼轴延长,但仅0.02%浓度有统计学差异,1%与3%均无统计学差异。可见,随浓度增高,两眼间差异减小。3.各组豚鼠视网膜上均不存在表达胰高血糖素阳性的细胞。 结论 1.早期运用阿托品滴眼液,能够抑制豚鼠形觉剥夺性近视的形成。2.在3%的浓度范围内,阿托品滴眼液对形觉剥夺性近视的抑制作用是浓度依赖性的,浓度越高,抑制作用越明显。3.阿托品通过抑制豚鼠眼玻腔加深,进而抑制其眼轴延长从而抑制形觉剥夺性近视的发生。4.阿托品并非通过调节豚鼠视网膜细胞对胰高血糖素的表达量来抑制眼轴延长的。 |