目的 探讨以自体、异体rASCs作为种子细胞分别复合PLGA支架材料构建组织工程角膜基质修复角膜基质层缺损的可行性,评价其修复效果并探讨其作用机制,为角膜组织工程种子细胞和生物支架材料的研究提供实验依据。 方法 构建兔角膜基质缺损模型,自体和异体rASCs-PLGA复合物体外培养7天后分别回植到相应角膜基质缺损模型的角膜基质层间,术后第12周和24周取材行大体观、组织学和透射电镜超微结构观察比较修复效果。单纯缺损不加移植物组和未接种细胞的PLGA材料移植组作为对照组。 结果 自体rASCs-PLGA组移植术后12周材料降解,角膜基本恢复透明,异体rASCs-PLGA组术后24周仍未恢复透明。组织学检查显示移植后24周自体rASCs-PLGA组新生角膜基质样组织与正常角膜基质组织相似,异体rASCs-PLGA组仍有明显缺损区域存在。电镜下胶原纤维直径比较显示,各组术后24周胶原直径均较12周时均一、排列也趋于整齐,自体rASCs-PLGA组角膜基质胶原直径纤维排列与正常角膜基质最为相似,异体组次之。 结论 体外培养的兔脂肪干细胞具有多向分化功能,与多孔PLGA支架具有良好的生物相容性,作为种子细胞来源可以构建出具有良好组织学结构的组织工程角膜基质用以修复角膜基质缺损,且自体细胞修复效果优于异体细胞。植入脂肪干细胞在体内微环境诱导下向角膜基质细胞表型转化,为脂肪干细胞多向分化功能提供了新的实验依据。 |