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| 组织型纤溶酶原激活物在视网膜新生血管形成中的作用研究 |
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作者：赵世红 文章来源：第二军医大学附属长海医院 点击数：263 更新时间：2012/9/13 
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目的 观察小鼠视网膜新生血管发生过程中组织型纤溶酶原激活物t-PA的表达及意义，探讨t-PA对视网膜新生血管发生和发展的影响。
方法 采用生后7天的C57BL/6J小鼠58只，随机分为缺氧模型组与正常对照组，每组29只（58只眼）。建立RF/6A细胞的正常及缺氧培养模型，定量分析细胞的VEGF表达，确定最佳PAI-1抑制浓度。用Transwell小室法检测PAI-1对RF/6A细胞迁移的影响；用MTT法检测PAI-1对RF/6A细胞增殖的影响；用RT-PCR和Western blot检测PAI-1对RF/6A细胞VEGF和ANXA2的表达影响。
结果 正常对照组小鼠在生后12、14、17、21天视网膜血管分布均匀，无异常改变。缺氧诱导组小鼠在生后12天可见视网膜大面积的无灌注区，仅周边部形成小面积的血管网；这种血管反应持续到生后21天。视网膜病理切片：在生后17天的小鼠正常对照组中很少见到突破视网膜内界膜的血管内皮细胞，对突破内界膜的血管内皮细胞核进行计数统计，平均为0.64±0.09/片/眼；而缺氧诱导模型组小鼠中可见大量突破视网膜内界膜的血管内皮细胞，平均为43.49±7.65/片/眼，且差别具有统计学意义(P<0.01)。 缺氧诱导组与正常对照组的t-PAmRNA相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05)，各时间点的t-PA mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。生后14天的缺氧诱导组与正常对照组小鼠视网膜t-PA mRNA的表达水平差异有统计学意义（P<0.05），其他时间差异无统计学意义（P﹥0.05)。在缺氧诱导组，随着视网膜新生血管的生长，t-PAmRNA的表达先增高，在第14天达到最大，之后开始下降。与正常对照相比，加入PAI-1后，显著抑制了RF/6A细胞的迁移，增殖（P<0.01）。同时，PAI-1降低了RF/6A细胞中VEGF和ANXA2的基因和蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。
结论 t-PA表达的增高可能对缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管的形成具有促进作用，并且该作用可能发生在新生血管形成的初期。PAI-1对的RF/6A细胞的增殖及迁移有抑制作用，其机理可能与抑制t-PA的表达，降低VEGF和ANXA2的表达有关。 |
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