目的 NMDA受体亚基3A(NR3A)在视网膜中的分布和神经保护机制。 方法 暗适应环境下饲养鲫鱼和C57/BL小鼠,球后注射40mg/kg碘酸钠建视网膜氧化损伤模型。实验分5组:空白组、氧化损伤组、NR3A受体阻断剂组(D-AP5)、腺相关病毒pAAV-8-shRNA-NR3A处理组、腺病毒空载体对照组。3d、7d、14d、21dHE染色检测光感受器层和RPE层细胞层厚度变化;7d和14d电镜扫描检测光感受器细胞的细胞器的形态变化;免疫荧光双标法分析NR3A在视网膜上的分布;Western blot检测NR3A受体表达水平的变化;腺相关病毒pAAV-8-shRNA-NR3A球内注射抑制NR3A的表达;Tunel法检测光感受器细胞的凋亡情况。 结果 球后注射碘酸钠导致的光感受器细胞减少主要集中在术后7天。免疫荧光双标法显示NR3A在鲫鱼光感受器细胞有分布,而在C57/BL小鼠光感受器细胞上未见NR3A的分布。氧化损伤组与NR3A受体药物阻断剂组的光感受器细胞的线粒体形态变化有差异,以小鼠为实验对象的实验组未见明显差异。Tunel法显示:NR3A表达被抑制后,由氧化损伤引起的光感受器细胞凋亡加重。 结论 NR3A能减轻氧化损伤引起的光感受器细胞的凋亡,从而对视网膜光感受器细胞有保护作用。 |