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| hLUM基因转基因鼠模型与病理性近视的相关性 |
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作者：宋彦铮 文章来源：首都医科大学附属北京同仁医院 点击数：312 更新时间：2012/9/13 
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目的:利用携带hLUM基因突变位点的转基因小鼠模型，研究过表达Lumican基因是否会引起小鼠眼轴，巩膜厚度，及胶原纤维表达含量的变化，以探讨Lumican基因突变与病理性近视间的相关性。
方法:以携带突变位点(cDNA 596T>C)的hLUM基因的转基因小鼠（15只，30眼）为研究对象，另以同日龄野生小鼠（15只，30眼）作为对照组。两组小鼠均于出生后56天处死，摘取双侧眼球，显微照相法拍照并测量其眼轴长度（角膜顶点到视神经处距离）；HE染色法观察小鼠眼球组织切片后部巩膜厚度；VG胶原染色法观察巩膜组织胶原纤维相对密度的变化；电镜观察后部巩膜组织超微结构变化；另以RT-PCR技术和western blot 技术检测小鼠巩膜组织中COL1A1及COL1A2基因编码的胶原蛋白以及LAMA1基因编码的层粘连蛋白转录及表达水平；并用免疫组化方法行COL1A1、COL1A2 及LAMA1蛋白表达的定位，定性及定量研究。
结果:显微照相法测量实验组小鼠（30眼）眼轴平均长度为（3.182±0.031）mm，对照组小鼠（30眼）眼轴平均长度为（3.049±0.026）mm，实验组小鼠较对照组出现眼轴延长，且差异有显著性意义（p<0.05）。HE染色切片（200X）观察实验组小鼠后部巩膜平均厚度为（68.38±4.72）um，对照组小鼠平均厚度（74.28±3.10）um，差异有显著性意义（p<0.05）。VG胶原染色切片（200X）实验组平均光密度较对照组有明显降低(p<0.05)。电镜观察结果显示实验组小鼠后部巩膜胶原纤维粗细不均，排列紊乱。RT-PCR法显示COL1A1及COL1A2基因编码的胶原蛋白以及LAMA1基因编码的层粘连蛋白的条带其光密度值有显著降低（p<0.01）。Western blot法和免疫组化法检测结果显示实验组较对照组各相应指标表达水平也有明显降低（p<0.05）。
结论:携带突变位点(cDNA 596T>C)的hLUM基因的转基因鼠发生了类似于人病理性近视的眼部表现，Lumican 基因突变与病理性近视的发生发展可能存在相关性。hLUM基因转基因鼠的建立为探讨病理性近视发病机制奠定了基础。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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