目的 通过观察不同浓度的枸杞多糖对体外培养的人视网膜色素上皮细胞的吞噬功能、清除脂褐素的功能及细胞增生活性探讨枸杞多糖防治AMD的可行性。 方法 1.观察枸杞多糖对hRPE细胞吞噬功能的影响:用密度梯度离心法提取猪眼光感受器外节(photorecepter ourer segment,POS),FITC标记后加入含不同浓度枸杞多糖的hRPE中,培养24h,荧光显微镜定性及定量测定hRPE细胞吞噬POS的荧光面积。2观察枸杞多糖对hRPE细胞清除脂褐素功能的影响:建立POS诱导的脂褐素模型,用流式细胞技术定量检测hRPE细胞内脂褐素自发荧光值。3观察枸杞多糖对脂褐素化的hRPE细胞增生能力的影响:培养脂褐素化的hRPE,通过MTT比色法测定不同浓度枸杞多糖干预hRPE细胞24h后hRPE细胞的OD值。 结果 1hRPE细胞吞噬猪POS荧光面积A组空白对照组为0,E组最多,C、D、E组与B组比较差异有统计学意义,(P<0.05)。2流式细胞技术检测hRPE细胞内脂褐素自发荧光值,A组最少,B组最多,C组、D组及E组细胞内自发荧光值与B组相比差异有统计学意义,(P<0.05)。E组与A组相比差异无统计学意义(P>0.05)3枸杞多糖干预hRPE细胞24h后hRPE细胞的OD值,A组最高,B组最低,C组、D组及E组OD值与B组相比差异有统计学意义(P<0.05),E组与A组相比差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 枸杞多糖能增强hRPE抗衰老作用,其作用机制与增强hRPE细胞吞噬POS的功能,清除脂褐素的功能及细胞增生活性有关。 |