目的  比较缺氧培养条件下新生大鼠视网膜祖细胞与脑神经干细胞内游离钙离子浓度的变化，以钙离子浓度相对较低作为耐受缺氧能力较强的指标，为选择最适于视网膜移植的干细胞提供实验依据。

方法  1.分离、培养、鉴定新生大鼠视网膜祖细胞及脑神经干细胞。2.按照是否缺氧培养及缺氧培养的时间进行实验分组。3.通过激光共聚焦显微镜扫描及光谱分析得到各组细胞内游离钙离子荧光强度。4.收集数据并进行统计学分析。

结果  1.正常培养条件下：两种细胞于培养基中悬浮生长，细胞逐渐增大、增殖并聚集成神经球，折光性强。与脑神经干细胞相比，视网膜祖细胞较小，折光性略弱，易死亡形成碎片并易贴壁分化。2.干细胞鉴定：视网膜祖细胞及脑神经干细胞均呈Nestin及Pax-6阳性染色。3.缺氧培养条件下：随缺氧时间延长，脑神经干细胞先于视网膜祖细胞出现细胞肿胀、贴壁、伸出突起、死亡等变化。4.激光共聚焦显微镜扫描：随缺氧时间延长，细胞内游离钙离子的绿色荧光逐渐增强。5.细胞内游离钙离子荧光强度统计分析：随缺氧时间延长，脑神经干细胞内钙离子荧光强度值逐渐增大（p<0.05），缺氧2h以上的视网膜祖细胞内钙离子荧光强度值逐渐增大（p<0.05），缺2h以内的视网膜祖细胞内钙离子荧光强度值无明显差异（p>0.05）；缺氧12h组的视网膜祖细胞内钙离子荧光强度小于脑神经干细胞（p<0.05）。

结论  1.正常培养条件下，脑神经干细胞的生长状态较视网膜祖细胞好；缺氧培养条件下，视网膜祖细胞的生长状态较脑神经干细胞好。2.缺氧培养2h以内视网膜祖细胞内游离钙离子浓度无明显差异；随缺氧时间延长，细胞内游离钙离子浓度逐渐增高。3.随缺氧培养时间延长，脑神经干细胞内游离钙离子浓度逐渐增高。4.缺氧12h组视网膜祖细胞内游离钙离子浓度低于脑神经干细胞。