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| 抗氧化剂对晶状体蛋白抗氧化损伤作用的研究 |
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作者：岑 洁 范… 文章来源：上海第二医科大学附属新华医院眼科 200092 点击数：2203 更新时间：2004/6/21 
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| 目的：通过抗氧化离体实验，用经典的抗氧化剂VitC，验证抗氧化剂对晶状体蛋白的抗氧化保护作用，并建立今后在体外设计、验证、筛选药物对晶状体抗氧化保护作用的评定指标。方法：15日龄SD大鼠，经皮下注射2mmol·L－1亚硒酸钠溶液建立白内障模型，在组织研磨过程中，加入经典的抗氧化剂VitC，经过差速分级离心分离，将正常SD大鼠晶状体和硒性SD大鼠白内障晶状体中不同晶状体蛋白进行分离得低分子量蛋白、高分子量蛋白和变性沉淀蛋白。运用Bradford法测定不同晶状体蛋白含量；PAGE和SDS-PAGE分析蛋白多肽成分的组成以及对蛋白质圆二色性的检测来了解其二级结构空间构象的变化，比较加入VitC溶液样品组和不加VitC溶液样品组在上述三方面的差异。结果：在VitC的保护作用下，正常SD大鼠的晶状体中的LMW的含量有所增高，而在白内障的晶状体中变化不明显；在PAGE电泳中，经VitC处理后的SD大鼠正常晶状体LMW的电泳条带中出现了多条的分子量较低的蛋白条带，而在非VitC处理的LMW的电泳条带中则出现了分子量较高的蛋白条带，且相同位置处的分子量较低的蛋白条带染色明显减弱，在HMW的电泳条带中，未出现蛋白条带，而在尿素溶蛋白的电泳条带中亦出现了类似LMW的情况；SDS-PAGE的泳带无明显改变；CD谱显示，经VitC处理后的蛋白样品，其CD谱在240nm-250nm处均出现正向峰，同时其负峰峰谷向短波长方向移动，提示α-螺旋增加，β-折叠减少。结论：VitC对晶状体蛋白具有一定的抗氧化保护作用，并初步得出今后在设计、验证、筛选药物对白内障的抗氧化保护作用时可依据的评价指标。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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