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三氧化二砷莪术抑制晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制 |
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| 三氧化二砷莪术抑制晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制 |
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作者：吴正正1 … 文章来源：1.中国中医研究院眼科医院 100040 点击数：1306 更新时间：2005/5/31 9:02:58 
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| 目的 探讨两种天然药物三氧化二砷（arsenite trioxide, As2O3）和莪术（rhizoma curcumae, RC）对体外培养的晶状体上皮细胞（lens epithelial Cell, LEC）增殖的抑制作用，并从信号转导机制方面深入研究其抑制LEC增殖的作用机制，为寻求防治后发性白内障(after cataract)的确切有效药物提供实验依据。
方法
采用牛LEC进行原代和传代培养，取第三代细胞用于实验。利用10ng/ml重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor, rhbFGF）诱导LEC增殖。同时分别将2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L的As2O3和5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml的RC作用于增殖状态下的LEC 72h，进行以下几方面的研究：
1、通过四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium, MTT）比色测定法来检测As2O3、RC对LEC增殖的抑制程度。
2、采用荧光分光光度计，利用钙荧光指示剂Fura-2/AM测定As2O3、RC抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2+]i) 变化。
3、采用放射免疫分析法测定As2O3、RC抑制 LEC增殖时细胞内环化腺苷酸 (cyclic adenosine monophosphate, cAMP)和环化鸟苷酸（cyclicguanosine monophosphate, cGMP）浓度变化。
结果
1、 As2O3、RC可明显抑制rhbFGF诱导的LEC增殖，并具有剂量依赖关系。
2、As2O3、RC抑制 LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2+]i) 显著升高, 并具有剂量依赖关系。
3、 As2O3、RC抑制 LEC增殖时细胞内cAMP浓度显著升高, cGMP浓度显著降低，
并具有剂量依赖关系。
结论
1、As2O3、RC都具有抑制LEC增殖的作用。
2、诱导[Ca2+]i升高，激活细胞内Ca2+信号转导途径是As2O3、RC抑制LEC增殖的作用机制之一。
3、上调细胞内cAMP水平，激活细胞内cAMP-PKA信号转导途径是As2O3、RC抑制
LEC增殖的作用机制之一。
4、 下调细胞内cGMP水平，干预细胞内cGMP-PKG信号转导途径是As2O3、RC抑制
LEC增殖的作用机制之一。
5、 两种天然药物As2O3、RC能够明显抑制LEC增殖的作用，使其有望成为防治后发
性白内障的有效药物。
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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