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| 银杏叶提取物对培养人视网膜神经节细胞保护作用的研究 |
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作者：王云松 … 文章来源：北京同仁医院 同仁眼科中心 北京市眼科研究所 点击数：1375 更新时间：2005/6/2 20:24:13 
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| 目的：建立用流式细胞术评价体外培养人视网膜神经节细胞（RGC）的方法；观察银杏叶提取物( EGb761)对分离人RGC的保护作用。
方法：一、人视网膜取自北京同仁医院眼库。将分离的视网膜制成细胞悬液，接种于培养皿，分为对照组（IMDM）及EGb761组，培养24小时后，将两组分为四组，分别向其中两组中加入谷氨酸，作用2小时。四组分别为：对照组，谷氨酸组，EGb761组，EGb761＋谷氨酸组。
二、免疫流式细胞术分析：以Thy-1作为RGC的特异抗体，7-AAD鉴定细胞存活率，进行免疫双染。每一样本中分析10000个细胞，前向角（FSC）反映细胞大小；侧向角反映胞浆形态；荧光强度反映RGC数量及死亡细胞数量。
结果： 1. 不同干预因素对人RGC存活率的影响 与对照组相比谷氨酸组RGC存活率降低（P<0.01），EGb761组升高（P<0.01），EGb761+谷氨酸组没有显著性差异（P>0.05）；与谷氨酸组相比EGb761组及EGb761+谷氨酸组RGC存活率均升高（P<0.01）。图1。2. 不同组中大RGC所占RGC总数百分比 各组间差异无显著性意义（P>0.05）。3. 死亡RGC中大RGC所占百分比 与对照组相比谷氨酸组死亡RGC中大RGC所占百分比无显著性升高（P>0.05），EGb761组及EGb761+谷氨酸组显著性降低（P<0.01）；与谷氨酸组相比EGb761组及EGb761+谷氨酸组大RGC死亡率显著性降低（P<0.01）。图2。4. 存活RGC中大RGC所占百分比 与对照组相比谷氨酸组存活RGC中大RGC所占百分比无显著性降低（P>0.05），EGb761组及EGb761+谷氨酸组显著性升高（P<0.05）；与谷氨酸组相比EGb761组及EGb761+谷氨酸组大RGC存活率显著性升高（P<0.01）。图3。
结论：用流式细胞术评价体外培养人视网膜神经节细胞（RGC）的方法可行；EGb761除了可直接作用于人RGC，提高其存活率之外，还可对抗谷氨酸兴奋性毒性作用造成的RGC损伤，有效保护大RGC。
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| 会议投稿录入：wyunsong 责任编辑：毛进 |
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