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雌激素对慢性高眼压鼠视网膜保护作用的实验研究 |
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作者:代艳 陈晓… 文章来源:四川大学华西医院 点击数:1365 更新时间:2005/6/7 9:38:49
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目的:观察雌激素对去势大鼠慢性高眼压导致视网膜、视神经损伤的保护作用。 方法:选用健康成熟雌性SD大鼠18只随机分为去势组、去势+雌激素组、对照组。切除卵巢术后第8d起去势+雌激素组大鼠开始皮下注射雌激素50µg/kg,隔日一次。在去势+雌激素组动物补充雌激素后24h,测血清雌激素浓度。切除卵巢术后2w,去势组和去势+雌激素组大鼠双眼经角巩膜缘激光光凝小梁网建立慢性高眼压模型,1w后行第二次光凝。分别于第一次光凝后7d,第二次光凝后7d、14d、28d、35d测量所有动物的双眼眼压。第二次光凝后第35d摘除眼球。观察RGCs、视神经轴突。TUNEL法检测视网膜GCL凋亡细胞。免疫组化染色结合图像分析系统观察视网膜bcl-2、bax、caspase-3的表达及分布,比较组间的IOD值差异。荧光实时定量RT-PCR法定量检测大鼠视网膜bcl-2、bax、caspase-3基因表达情况,比较组间扩增效率的差异。结果:去势+雌激素组和其它两组大鼠的血清雌激素比较,差异显著的统计学意义(p<0.05)。光凝后各时点眼压测量结果示:去势组与去势+雌激素组大鼠的眼压均较对照组升高,差异有统计学意义。去势+雌激素组视网膜神经节细胞数较去势组多,具有统计学意义(p<0.05);视神经轴突损伤较轻。对照组大鼠视网膜未见被TUNEL法标记的阳性凋亡细胞。去势组GCL和INL可见凋亡细胞。去势+雌激素组GCL凋亡细胞数与去势组比较,差异具有统计学意义(p<0.05)。对照组视网膜组织中未见bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达。去势组见caspase-3表达主要为GCL胞浆浅黄至棕黄染色;未见bcl-2及bax蛋白表达。去势+雌激素组视网膜caspase-3蛋白表达较去势组少,bcl-2表达较去势组多,差别均有统计学意义;未见bax表达。荧光实时定量RT-PCR结果显示:bcl-2在去势+雌激素组中的扩增效率明显高于去势组的扩增效率,差异具有统计学意义。caspase-3在去势+雌激素组中的扩增效率明显低于去势组的扩增效率,差异具有统计学意义。结论 激光光凝大鼠小梁网可使眼压长期稳定在轻到中等高眼压水平,对研究青光眼的视网膜、视神经的改变提供了较理想的动物模型。雌激素对慢性高眼压大鼠RGCs具有保护作用,可能通过升高bcl-2,部分阻断caspase-3,减少细胞凋亡发挥作用。 |
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会议投稿录入:樱桃番茄 责任编辑:毛进 |
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